细胞外囊泡(Extracellular vesicles，EVs)是来源于细胞的脂质双层包裹的纳米囊泡。外泌体(Exosomes)作为EVs的一个亚型，由于具有体积较小、能跨越生物屏障、循环稳定和固有靶向性等特性，成为非常有吸引力的药物输送载体。目前对于外泌体的获取，主要是基于差速超速离心，对细胞培养上清液的外泌体进行离心分离、收集和浓缩；但是在分析外泌体的内容物、研究其功能或用于治疗应用之前，储存条件对sEVs(small EVs)特性的影响还没有完全阐明，也缺乏对不同储存条件的对比评价。
▲ 典型的外泌体结构。外面由磷脂双层包围，含有对运输很重要的膜联蛋白；用于细胞靶向的四环素以及参与其他生物过程的蛋白。
近日，中南大学、湖南省转化医学与创新药物工程研究中心向大雄教授课题组通过差速超速离心分离获得bEnd.3细胞来源的sEVs，并测试了保存条件对sEVs的大小、数量、蛋白质/RNA含量和与治疗应用相关的性质影响。在研究不同储存温度对sEVs在活体治疗应用的影响时，采用博鹭腾AniView100多模式动物活体成像系统进行了连续纵向检测sEVs在活体体内生物分布。结果直观清晰地显示储存会显著影响bEnd.3细胞来源的sEVs的脑靶向能力；因此，对于sEVs的治疗应用，应使用新鲜的sEVs或可在-80℃下短期保存备用。相关成果已发表在期刊《Drug Delivery》，可为未来sEVs的商业化储存提供参考。
▲ 使用博鹭腾AniView100拍摄的sEVs在小鼠体内和体外器官的生物分布结果。
(A) sEVs在健康小鼠体内的生物分布
(B) 在小鼠主要器官的生物分布
(C) sEVs在小鼠脑部生物分布比较
(D) sEVs在小鼠器官中的荧光信号强度
(E) sEVs在小鼠脑部荧光信号的强度
参考文献：
1、Wu J Y , et al. Preservation of small extracellular vesicles for functional analysis and therapeutic applications: a comparative evaluation of storage conditions[J]. Drug Delivery, 2021, 28(1):162-170.
2、Kourembanas, Stella. Exosomes: Vehicles of Intercellular Signaling, Biomarkers, and Vectors of Cell Therapy[J]. Annual Review of Physiology, 2015, 77(1):13-27.