▶ 产品简介
5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(含 DTT) (SDS-PAGE Sample Loading Buffer,5×(with DTT))是蛋白质样品进行SDS-PAGE的即用型上样缓冲液。产品中的SDS可与蛋白质结合成SDS-蛋白质复合物,使其带上大量的负电荷,消除蛋白质本身的电荷差异;产品中的DTT能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂,破坏蛋白质的结构,消除蛋白质结构之间的差异。最终,蛋白质的迁移速度只与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂,以确定电泳的进行情况。
▶ 产品规格
▶ 保存条件
-20°C保存,有效期24个月,建议分装冻存,避免反复冻融。
▶ 使用方法
1. 室温或水浴溶解蛋白上样缓冲液后,室温放置。
2. 按每4 µL蛋白质样品中加入1 µL的5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液,将蛋白样本和蛋白上样缓冲液充分混合均匀。
3. 95~100°C水浴加热10 min,使蛋白质充分变性。
4. 冷却至室温后,12,000 rpm离心2 min,收取上清。
5. 取10~20 µL上清加入SDS-PAGE凝胶加样孔内进行电泳即可。
6. 通常当蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
▶ 温馨提示
1. 本产品 -20°C保存时,可能会出现SDS沉淀,请于温水中溶解后使用。请按使用情况适当分装保存,避免反复冻融。
2. 样品煮沸后,若仍有比较粘稠或粘稠状的半透明物体,可适当延长煮沸时间或加入1×SDS上样缓冲液后再次煮沸,使结合在基因组DNA上的蛋白质充分释放,并使基因组DNA部分断裂,减少样本粘稠度的产生。
3. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
4. 本制品含有DTT,具有轻微刺激性气味,有一定的毒性。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。