试剂产品

¢ 产品简介：

BLT DiI是一类长链的亲脂性荧光染料，用于标记细胞膜以及其他脂溶性生物结构，激发后呈橙红荧光。其在水中荧光强度很弱，与细胞膜结合或者与亲脂性生物分子结合时，其荧光强度显著增强。DiI被广泛用于正向或逆向的，活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂，通常不会影响细胞的生存力。DiI除了最简单的细胞膜荧光标记外，还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程中细胞迁移，通过FRAP检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。

¢ 产品基本参数：

别称：BLT DiI，DiI(DiIC18(3))

分子量：~933

形态：固体粉末

纯度：95+%

溶剂：DMSO/DMF/EtOH

激发波长：550 nm

发射波长：567 nm

¢ 保存条件：

避光干燥保存；粉末状态： -20 °C，有效期二年。溶液状态： -20 °C，有效期一年；

¢ 使用方法：

1. 染色液制备

（1）配置DMSO或EtOH 储存液：储存液用DMSO或EtOH配置浓度1～5 mM。储存液分装储存在-20 ℃或-80 ℃，避免反复冻融。

（2）工作液制备：根据染色体系用合适的缓冲液（如：无血清培养基，PBS）稀释储存液，配制浓度为1～5 μM的工作液。最佳染色的工作液浓度与细胞系和实验体系有关，可多次尝试染色实验优化，且工作液现配现用。

2. 悬浮细胞染色

（1）加入适当体积（300 μL）的染色工作液重悬细胞，染色细胞浓度可尝试1×10⁶/mL。

（2）孵育细胞：在室温或37 ℃环境避光孵育细胞，不同的细胞最佳培养时间不同。建议首次孵育细胞20 min，之后可优化孵育时间，以得到均一的标记结果。

（3）清洗多余染料：孵育结束，以1000～1500 rpm离心细胞5 min，去除上清液，用缓冲液重复清洗操作三次，注意缓慢操作。

3. 贴壁细胞的染色

（1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

（2）从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，将盖玻片放在潮湿的环境中。

（3）在盖玻片的一角加入适当体积（300 μL）的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

（4）以相同悬浮细胞的孵育条件进行孵育，及孵育时间优化。

（5）吸干染料工作液，用培养液或缓冲液清洗盖玻片3次以上。

注：本方案仅供参考，具体实验条件请研究人员依据自身项目进行优化。

附表：

¢ 注意事项:

1．为了您的自身安全，实验前请做好有效防护；

2．最佳染色的工作液浓度与细胞系和实验体系有关，可多次尝试染色实验优化，且工作液现配现用；

3．本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内！